关于待染组织切片的保存
对需要用到临床石蜡包埋组织样本做免疫组化检测的研究者来说,为了方便,不少人都会选择把所有的蜡块标本都一次性找出来,都切好切片后,存在实验室的抽屉里,开始先用部分来摸索实验条件,然后有空就做一批,并做好相应的实验记录,结果采图等,有时候中间可能又有其他事情在忙,全部样本检测完毕有时候要拖上一两个月甚至两三个月。
这里就存在一个问题,组织切片在室温中是否可以长期保存? 答案是否定的!
不少研究文献都有提及过这一点,比如曾经有文献指出,在常温下保存三个月后的组织切片器IHC染色强度仅为新切切片的50%。究其原因,可能是从蜡块中切下来的组织切片,切口位置的组织已经失去的石蜡的保护,这些组织在室温下和空气接触,会加速组织内蛋白的抗原性的丢失。
那么究竟切片在室温条件下保存多长时间内比较保险呢?这个目前还没有统一的规定。而根据美国临床肿瘤协会对于HER-2检测的指南中,在质量控制方面曾指出,不推荐使用切片时间大于6周的组织切片用于HER-2的免疫组化检测。所以,IHC实验从一开始就需注意控制好保存切片的条件和时间限度,建议常温中保存一般不超过6周,高温天气中则需控制的更短。
如果IHC实验周期确实比较长,建议把2周内染不完的组织切片都放到2-8℃的冰箱中(置于密闭切片盒,避免冰箱中过多湿气接触切片); 同时亦不推荐把短期需取出的切片放到冰冻格里面保存(-20℃~-40℃)。
组织切片的保存只是一个小细节,不少研究者可能会无意中有所忽视,但这一IHC实验上游的变数直接关系到实验结果的客观可靠性。就科学研究来说,只有对研究工具研究技术的严格把控,才可能得到可重复的客观结果。