抗体的分装保存和稀释

1、  抗体的分装保存

        做科研实验时用到的免疫组化一抗，多为浓缩液的形式。对于包装规格较大和预计使用周期较长的一抗浓缩液，建议根据用量进行分装保存，分装后的抗体需根据抗体使用说明书指明的条件，保存在－20℃~－40℃低温冰箱中或2～8℃保存（并非所有的供应商都推荐一抗浓缩液在冰冻条件下长期保存）。这样可以减少抗体反复开盖平衡至室温和反复冻融引起的效价下降。抗体分装时的储存容器应由不吸附蛋白质的材料制成，如聚丙烯，聚碳酸酯和硼硅酸玻璃。

        即用型抗体工作液可在2～8℃冰箱中保存，无需在低温冰箱中保存。

2、  浓缩液抗体的稀释

        抗原抗体的结合与两者之间的分子比例有密切关系。如果使用的抗体浓度太高，抗体分子在特异性结合目标抗原后剩余过多，将会造成抗体与组织其他成分的非特异性结合的增加，使背景染色明显增强，甚至出现区域假阳性现象。因此，选择适当的抗体稀释度，不仅能节省抗体，而且还是获得满意染色结果必要条件。

        在实际工作中，有很多抗体都从试剂公司购买，厂家所附的说明书上对抗体的稀释度通常已经标明，给了一个适当的参考范围。第一抗体的使用浓度是免疫组织化学染色的关键之一，在第一次使用某种新的一抗时，有必要对抗体的最佳稀释度进行测定（如在推荐稀释度的上下区域梯度稀释后进行检测）。

         浓缩液抗体的稀释是一个相当比较简单的操作，不少研究者会用实验室自己配置的PBS来进行稀释。这里需要提出关注的是——稀释后抗体的稳定性。

         一般来说，浓缩液稀释成工作液后当天马上用完，不容易出现稳定性的问题。而有时候由于某些一抗的效价比较高，一次稀释出来的工作液的量比较大，在当天用不完的时候有些研究者会选择就这样保存在冰箱中，等下次再用。这样的操作可能会对实验带来一定的变数，虽然PBS可以用来稀释抗体浓缩液，但并非稳定保存抗体的有效试剂。在单纯的PBS中，抗体效价会下降的比较快。

        因此，如需较长时间保存稀释后的抗体，推荐还是使用商品化的高质量的抗体稀释液，其中一般含有合适浓度抗体保护剂和稳定剂，可以有效的提高抗体工作液试剂稳定性。另外，优质的抗体稀释液还可以有效的降低由于非特异性蛋白吸附导致的免疫组化染色背景。